¿Qué es isoelectroenfoque?

El isoelectroenfoque es una técnica utilizada en la electroforesis de proteínas que permite separar las proteínas de acuerdo a su punto isoeléctrico. El punto isoeléctrico es el pH en el cual la carga neta de una proteína es cero, es decir, no tiene carga eléctrica positiva ni negativa.

En el isoelectroenfoque, se utiliza un medio degradado de pH a lo largo de una matriz gel, que permite generar un gradiente de pH desde un extremo ácido hasta un extremo básico. Las proteínas son colocadas en este gradiente y migran en respuesta a su carga neta y al pH local. Una vez que una proteína alcanza su punto isoeléctrico, su carga neta se vuelve cero y deja de migrar. Esto permite la separación de las proteínas en bandas, cada una correspondiendo a una proteína en particular.

Esta técnica es útil para separar proteínas de alta resolución y para identificar la presencia de isoformas o variantes proteicas que difieren en su punto isoeléctrico. Además, el isoelectroenfoque se utiliza también como una etapa previa para otras técnicas de separación y análisis de proteínas, como la electroforesis bidimensional.

El isoelectroenfoque se puede realizar tanto en geles de poliacrilamida como en geles de agarosa, y puede ser seguido por la detección y cuantificación de las proteínas separadas mediante tinción, inmunodetección o espectrometría de masas.

En resumen, el isoelectroenfoque es una técnica de separación de proteínas basada en sus puntos isoeléctricos, que permite la separación y análisis de proteínas en función de su carga neta y su comportamiento en un gradiente de pH. Es una técnica ampliamente utilizada en la investigación biomédica y en la producción de proteínas recombinantes.